Wissenschaft | Science

English

Enzootic pneumonia (EP) of pigs, caused by Mycoplasma hyopneumoniae has been a notifiable disease in Switzerland since May 2003. The diagnosis of EP has been based on multiple methods, including clinical, bacteriological and epidemiological findings as well as pathological examination of lungs (mosaic diagnosis). With the recent development of a real-time PCR (rtPCR) assay with 2 target sequences a new detection method for M. hyopneumoniae became available. This assay was tested for its applicability to nasal swab material from live animals. Pigs from 74 herds (average 10 pigs per herd) were tested. Using the mosaic diagnosis, 22 herds were classified as EP positive and 52 as EP negative. From the 730 collected swab samples we were able to demonstrate that the rtPCR test was 100% specific. In cases of cough the sensitivity on herd level of the rtPCR is 100%. On single animal level and in herds without cough the sensitivity was lower. In such cases, only a positive result would be proof for an infection with M. hyopneumoniae. Our study shows that the rtPCR on nasal swabs from live pigs allows a fast and accurate diagnosis in cases of suspected EP.

Keywords: Mycoplasma hyopneumoniae,diagnosis,real-time PCR,nasal swabs,live pigs

Deutsch

Die durch Mycoplasma hyopneumoniae verursachte Enzootische Pneumonie (EP) der Schweine ist in der Schweiz eine meldepflichtige Tierseuche. Seit 2003 wird sie gesamtschweizerisch bekämpft. Die Diagnose EP erfolgt bis jetzt anhand der Kombination von verschiedenen diagnostischen Verfahren. Klinik, epidemiologische Daten, der Erregernachweis mittels Immunfluoreszenz oder Giemsa-Färbung, Serologie sowie die makroskopische und histologische Untersuchung veränderter Lungen bilden Teile der sogenannten Mosaikdiagnose. Mit der kürzlichen Entwicklung eines real-time PCR (rtPCR) Tests mit zwei Zielsequenzen stand eine neue Nachweismethode für M. hyopneumoniae zur Verfügung. Diese wurde auf die Anwendbarkeit an Nasentupfern lebender Tiere getestet. In 74 Beständen wurden durchschnittlich 10 Schweine untersucht. Mittels Mosaikdiagnose wurden 22 der untersuchten Herden als EP positiv und 52 als EP negativ klassifiziert. Anhand der gesammelten 730 Nasentupfer konnte gezeigt werden, dass die verwendete rtPCR 100% spezifisch und im Fall von Husten auf Betriebsebene auch 100% sensitiv ist. Auf Einzeltierebene und in chronisch oder latent infizierten Betrieben wies die rtPCR tiefere Werte für die Sensitivität auf. In diesen Fällen wäre nur ein positives Resultat beweisend für eine Infektion mit M. hyopneumoniae. Unsere Untersuchung zeigt, dass die rtPCR im Fall von Husten eine schnelle und sichere Diagnose am lebenden Tier erlaubt.

Schlüsselwörter: Mycoplasma hyopneumoniae,Diagnose,real-time PCR,Nasentupfer,lebende Schweine

Français

La pneumonie enzootique causée par Mycoplasma hyopneumoniae est une maladie à déclaration obligatoire en Suisse. Depuis 2003 elle est combattue au plan national. Jusqu'à maintenant, le diagnostic est posé sur la base d'une combinaison de différents procédés. L'examen clinique, les données épidémiologiques, la mise en évidence de l'agent par immunofluorescence ou coloration de Giemsa, la sérologie ainsi que l'examen macroscopique et histologique des poumons altérés forment des éléments de ce diagnostique mosaïque. Avec le récent développement d'une PCR en temps réel (real-time PCR/rtPCR) une nouvelle méthode de diagnostic de Mycoplasma hyopneumoniae est à disposition. La praticabilité de cette méthode sur des écouvillons naseaux d'animaux vivants a été testée. Dans 74 exploitations on a examiné en moyenne 10 porcs. Le diagnostic mosaïque a permis de classer 22 exploitations comme positives et 52 comme négatives. Sur la base des 730 écouvillons nasaux collectés, on a pu montrer que la rtPCR est spécifique à 100% et également sensible à 100% en cas de toux dans l'exploitation. Sur des exploitations détenant des animaux isolés ainsi que dans celles infectées de façon chronique ou latente, la rtPCR présente des valeurs de sensibilité plus faible. Dans ces cas, seul un résultat positif prouve une infection à Mycoplasma hyopneumoniae. Notre recherche montre que la PCR en temps réel permet, en cas de toux, un diagnostic rapide et sûr sur les animaux vivants.

Italiano

In Svizzera si è tenuti all'obbligo generale di notifica dell'animale infetto in caso di polmonite enzootica (PE) nei suini provocata dal Mycoplasma hyponeumoniae. Dal 2003 viene combattuta su tutto il territorio svizzero. Finora la diagnosi PE risultava in base alla combinazione di diversi procedimenti diagnostici. Aspetti clinici, dati epidemiologici, dimostrazione della presenza dell'agente tramite immunofluorescenza o colorazione Giemsa, analisi sierologiche così come l'analisi macroscopia e istologica dei polmoni lesionati sono le parti della cosiddetta diagnosi a mosaico. Con il recente sviluppo di un test real-time-PCR (rtPCR) con due sequenze target d'arrivo si ha a disposizione un nuovo metodo di indagine per rilevare il M. hypopneumoniae. L'applicabilità di quest'ultimo è stata testata con tamponi nasali di animali vivi. Nelle 74 mandrie sono stati analizzati in media 10 suini. Tramite la diagnosi a mosaico, 22 dei focolai esaminati sono stati classificati PE positivi e 52 quali negativi. In base ai 730 tamponi nasali raccolti si può mostrare che il rtPCR utilizzato è specifico nel 100% e in caso di tosse a livello delle aziende pure sensitivo al 100%. A livello di animali singoli infettati e aziende infettate in modo cronico o latente, il rtPCR dimostra valori bassi per la sensitività. In questi casi solo un risultato positivo dimostra l'infezione da M. hypopneumoniae. La nostra ricerca mostra che il rtPCR nei casi di tosse consente una diagnosi rapida e sicura sull'animale vivo.