Science

English

In this article the myocardial expression of different hyperpolarization-activated, cyclic nucleotide-gated (HCN) isoforms in myocardial tissue from healthy control cats and cats with hypertrophic cardiomyopathy (HCM) was evaluated. Myocardial tissue samples of the left ventricle of control cats (n = 12) and cats with HCM (n = 4) were collected. Expression of feline HCN was determined by immunoblot analysis using antibodies against HCN2 and HCN4. Optical densities of HCN bands were compared among groups by use of the Mann-Whitney Rank Sum test. HCN4 was reliably detected in myocardial tissue whereas HCN2 was not. HCN4 expression was significantly increased in left ventricular (LV) myocardial samples of cats with HCM (P = 0.036) compared to control cats. Results indicate that myocardial HCN4 expression can be evaluated in cats by immunoblot analysis and that HCN4 expression is upregulated in LV myocardial tissue of cats with HCM. The pathophysiological importance of HCN overexpression with regard to myocyte function and altered automaticity deserves further study.

Keywords: feline,cardiology,funny current,Western blot analysis,arrhythmia

Deutsch

In diesem Artikel wird die myokardiale Exprimierung von verschiedenen Isoformen von Hyperpolarisations-aktivierten, Zyklonukleotid-regulierten Proteinen (HCN) bei gesunden Katzen und Katzen mit Hypertropher Kardiomyopathie (HCM) untersucht. Hierzu wurden Muskelgewebeproben des linken Ventrikels von 12 Kontrollkatzen und 4 Katzen mit einer Hypertrophen Kardiomyopathie gesammelt. Die Höhe der HCN Exprimierung wurde mittels Immunoblot Analyse mit Antikörpern, die gegen HCN2 und HCN4 gerichtet waren, ermittelt. Die optische Dichte der HCN Bänder wurde statistisch ausgewertet und mittels Mann-Whitney Rank Sum Test verglichen. HCN4 konnte in sämtlichen Proben gefunden werden wohingegen HCN2 nur unzuverlässig nachgewiesen werden konnte. Die Exprimierung von HCN4 im Myokard des linken Ventrikels war signifikant höher bei Katzen mit HCM verglichen mit Kontrollkatzen (P = 0.036). Diese Resultate zeigen, dass die Exprimierung von HCN4 bei Katzen mittels Immunoblot Analyse gemessen werden kann, und dass die HCN4 Exprimierung bei Katzen mit HCM in Proben des Myokards vom linken Ventrikel erhöht ist. Weitere Studien werden benötigt, um die pathophysiologische Bedeutung der HCN-Überexprimierung in Hinsicht auf die Funktion von Herzmuskelzellen und deren Einfluss auf die veränderte Automatie zu untersuchen.

Schlüsselwörter: Katzen,Kardiologie,Funny Kanäle,Western blot,Arrhythmie

Français

Dans cet article, on étudie l'expression myocardique de diverses iso-formes de protéines activées par hyperpolarisation et régulées par des cyclonucléotides chez des chats sains et des chats souffrant de cardiomyopathie hypertrophique (HCM). On a collecté pour cela des échantillons de muscle provenant du ventricule gauche chez 12 chats de contrôle et chez 4 chats souffrant d'une cardiomyopathie hypertrophique. Le niveau de l'expression des HCN a été mesuré par une analyse sur immunblot avec des anticorps dirigés contre HCN2 et HCN4. La densité optique des lignes HCN a été analysée statistiquement et comparée au moyen du Mann-Whitney Rank Sum Test. Des HCN4 ont été trouvés dans tous les échantillons, alors les HCN2 n'étaient mises en évidence que de façon peu fiable. L'expression des HCN4 dans le myocarde du ventricule gauche était significativement plus élevée chez les chats souffrant de HCM par rapport aux chats de contrôle (P = 0.036). Ces résultats montrent que l'expression de HCN 4 chez les chats peut être mesurée par analyse immunoblot et que cette expression est plus élevée dans le myocarde du ventricule gauche chez les chats souffrant de HCM. D'autres études seront nécessaires pour examiner la signification pathophysiologique de la surexpression des HCN par rapport à la fonction des cellules du myocarde et son influence sur leur automatie modifiée.

Italiano

In questo articolo, l'espressione del miocardio di diverse isoforme di proteine attivate in iperpolarizzazione modulata da nucleotidi ciclici (HCN) è stata studiata in gatti sani e gatti con cardiomiopatia ipertrofica (HCM). A questo scopo sono stati raccolti campioni di tessuto muscolare del ventricolo sinistro in 12 gatti di controllo e in 4 gatti con cardiomiopatia ipertrofica. La quantità dell'espressione di HCN è stata determinata mediante l'analisi immunoblot utilizzando anticorpi diretti contro HCN2 e HCN4. La densità ottica delle bande HCN è stata valutata statisticamente e confrontata con il test Mann-Whitney Rank Sum. L'HCN4 è stata trovata in tutti i campioni, mentre l'HCN2 solo raramente. L'espressione di HCN4 nel miocardio del ventricolo sinistro era significativamente maggiore nei gatti con HCM rispetto ai gatti di controllo (P = 0.036). Questi risultati dimostrano che l'espressione di HCN4 nei gatti può essere misurata mediante analisi immunoblot, e che l'espressione di HCN4 nei gatti affetti da HCM è aumentata in campioni di miocardio provenienti dal ventricolo sinistro. Ulteriori studi sono necessari per capire la fisiopatologia della sovraespressione di HCN rispetto alla funzione del muscolo cardiaco e l'influenza sulle alterazioni dell'automatismo.